Kursdetails
Überblick
Dieses intensive dreitägige Praxistraining bietet eine praxisnahe Einführung in die Durchflusszytometrie und die fluoreszenzaktivierte Zellanalyse.
Der Kurs umfasst den gesamten Arbeitsablauf: Prinzipien der Durchflusszytometrie, Interpretation von FSC/SSC, Fluoreszenzdetektion, Auswahl von Fluorochromen und Antikörpern, Paneldesign, Probenvorbereitung, Oberflächen- und intrazelluläre Färbung, Kompensation, Kontrollen, Datenerfassung, Gating-Strategien und Datenauswertung.
Die Teilnehmenden erwerben theoretisches Verständnis und praktische Erfahrung mit durchflusszytometrischen Arbeitsabläufen, wie sie in Immunologie, Krebsbiologie, Stammzellforschung und biomedizinischen Laboren eingesetzt werden.
Lernziele
Nach Abschluss des Workshops sind die Teilnehmenden in der Lage:
- die Prinzipien der Durchflusszytometrie und der Fluoreszenzdetektion zu verstehen
- FSC-, SSC- und Fluoreszenzsignale zu interpretieren und zu erklären
- die Sicherheitsrichtlinien für BSL-2-Labore anzuwenden
- die Grundlagen von Fluorochromen, Antikörpern und Paneldesign zu verstehen
- Proben für die durchflusszytometrische Analyse vorzubereiten
- Oberflächenmarkerfärbungen mit Kontrollen durchzuführen
- Kompensation und Gating-Strategien zu verstehen
- Daten am Durchflusszytometer zu erfassen
- intrazelluläre Färbung sowie Fixierungs-/Permeabilisierungsabläufe zu verstehen
- FACS-Daten mit Softwaretools zu analysieren
- Zellpopulationen und quantitative Messgrößen zu interpretieren
- typische Probleme in der Durchflusszytometrie zu beheben
- Anwendungen in Immunologie, Krebs- und Stammzellforschung zu verstehen
Zielgruppe
Dieser Kurs eignet sich besonders für:
- Master-Studierende und Promovierende
- wissenschaftliche Hilfskräfte und technische Assistentinnen und Assistenten
- Forschende aus Immunologie, Krebsbiologie, Stammzellforschung und Biomedizin
- Studierende der Biotechnologie und Life Sciences
- Fachkräfte, die in die durchflusszytometrische Forschung einsteigen
- Wissenschaftlerinnen und Wissenschaftler, die ihre praktischen FACS-Kompetenzen stärken möchten
Kursprogramm
Tag 1: Grundlagen der Durchflusszytometrie & Versuchsplanung
Schwerpunkt: Prinzipien, Gerätetechnik und Probenvorbereitung
| Uhrzeit | Inhalt | Format |
|---|---|---|
| 09:00–09:30 | Begrüßung & Kursüberblick | Vortrag |
| 09:30–10:30 | Einführung in die BSL-2-Richtlinien & Laborsicherheit | Vortrag |
| 10:30–11:15 | Prinzipien der Durchflusszytometrie: FSC, SSC & Fluoreszenzdetektion | Vortrag |
| 11:15–11:30 | Kaffeepause | |
| 11:30–12:30 | Fluorochrome, Antikörper & Grundlagen des Paneldesigns | Vortrag |
| 12:30–13:30 | Mittagspause | |
| 13:30–15:00 | Probenvorbereitung & Ablauf der Zellfärbung | Labor |
| 15:00–15:15 | Kaffeepause | |
| 15:15–16:30 | Praxis: Oberflächenmarkerfärbung & Kontrollen | Labor |
| 16:30–17:00 | Fragerunde & Tagesabschluss | Diskussion & Fragerunde |
Tag 2: Datenerfassung & fortgeschrittene Färbestrategien
Schwerpunkt: Probenmessung und Mehrfarbenanalyse
| Uhrzeit | Inhalt | Format |
|---|---|---|
| 09:00–09:30 | Überblick Tag 2 & Geräteeinrichtung | Fragerunde |
| 09:30–10:30 | Kompensation, Kontrollen & Gating-Strategien | Vortrag |
| 10:30–10:45 | Kaffeepause | |
| 10:45–12:30 | Praxis: Datenerfassung am Durchflusszytometer | Labor |
| 12:30–13:30 | Mittagspause | |
| 13:30–14:30 | Intrazelluläre Färbung & Prinzipien der Fixierung/Permeabilisierung | Vortrag + Demo |
| 14:30–15:30 | Praxis: Intrazelluläre Färbung / Apoptosefärbung | Labor |
| 15:30–15:45 | Kaffeepause | |
| 15:45–16:30 | Fehlerbehebung bei durchflusszytometrischen Experimenten | Diskussion |
| 16:30–17:00 | Tagesabschluss | Diskussion & Fragerunde |
Tag 3: Datenanalyse, Interpretation & Anwendungen
Schwerpunkt: Analyse und biologische Interpretation
| Uhrzeit | Inhalt | Format |
|---|---|---|
| 09:00–09:30 | Einführung in Software zur FACS-Datenanalyse | Vortrag + Demo |
| 09:30–11:00 | Praxis: Gating & Populationsanalyse | Computer-Session |
| 11:00–11:15 | Kaffeepause | |
| 11:15–12:30 | Quantitative Analyse & Datenauswertung | Computer-Session |
| 12:30–13:30 | Mittagspause | |
| 13:30–14:30 | Anwendungen der Durchflusszytometrie in Immunologie, Krebs- & Stammzellforschung | Vortrag |
| 14:30–15:15 | Versuchsplanung für Mehrfarbenpanels | Diskussion |
| 15:15–15:30 | Kaffeepause | |
| 15:30–16:00 | Diskussion einer Fallstudie & Präsentation der Ergebnisse | Diskussion |
| 16:00–16:30 | Abschluss, Feedback & Zertifikate | Fragerunde |
Ihr Mehrwert
Die Teilnehmenden gewinnen:
- ein praxisnahes Verständnis durchflusszytometrischer Arbeitsabläufe
- Erfahrung mit Probenvorbereitung und Zellfärbung
- Wissen über Strategien zur Oberflächenmarker- und intrazellulären Färbung
- Verständnis von Kompensation, Kontrollen und Gating
- praktische Einblicke in Datenerfassung und -analyse
- Kompetenz in Populationsanalyse und biologischer Interpretation
- Strategien zur Behebung typischer FACS-Probleme
- Vorbereitung auf durchflusszytometrische Anwendungen in Forschung und Industrie
